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在依州大当前研究条件下，猪繁殖呼吸综合征病毒（PRRSV）RNA检出率取决于样本类型以及选用的病毒分离株。血清和血液涂样的整体表现最好，检出率最高，且在各个试剂盒之间的一致性最好。在阳性样本比例低的情况下，检测混合样本会造成检出率降低。

由于PRRSV造成的经济影响很大，因此需要对其进行快速、准确的诊断，根据依州大的Tanja Opriessnig博士。PRRSV毒株变异率高、进化迅速、遗传变异大，因此长期、可靠的诊断分析方法的开发是很复杂的，因此商业生产当中有报导假阴性结果的出现。

本课题的目的是：

对市面上三种商业性实时RT PCR分析方法用来检测来自6中不同PRRSV分离株其中一种分离株的公猪的不同个体（血清、精液、血涂样、口腔液）或混合样本（精液、血涂样）类型的敏感度、特异性和完成时间进行对比，以及对不同商业性抗体检测系统早期检测口腔液和血清当中PRRSV抗体的效果进行比较。

采用六组每组三头PRRSV阴性公猪，每头接种五种PRRSV分离株（ORF5当中55至99％的核苷酸序列相同）当中的一种。

接种后（dpi）-2、1、3、5、7、14和21天才级样本，用三种商业性实时RT-PCR试验当中的一种进行检测：TaqMan 北美及欧盟PRRSV试剂（AB, 应用生物系统）；Tetracore美国及欧洲PRRSV Master Mix (TC, Tetracore)，以及AcuPig PRRSV实时PCR (AD, AnDiaTec GmbH)。

dpi 1日，所有RT-PCR试验在每组中至少检出了一个阳性样本。检出率最高的是dpi 3和dpi 5。在dpi 1和7之间，血清样本检出率最高（90％），试验方法间一致率100％，其次是血涂样（Kappa = 0.97）和精液（Kappa = 0.80）。

口腔液检出率最低（AB: 55％；TC: 41％；AD: 46％），不同试剂盒之间最不一致（Kappa = 0.63）。

如果有一份病毒RNA样本为高度阳性，那么混合样本的检出率不会降低。

血清和血涂样的RNA提取周期更短。

AB分析的PCR反应时间短1.6倍。血清和口腔液样本还用ELISA HerdChek PRRS X3 (E1, IDEXX实验室)、血清样本还用CIVTESTsuis A/S (E2, 用于1型PRRSV检测)和CIVTESTsuis E/S (E3用于2型PRRSV检测，西班牙Amer的Hipra实验室)进行了检测。

在血清样本中，与E2和E3相比E1特异性和敏感度更高。在dpi 7，33％（5/15）猪只E1检测结果为阳性，而E2和E3未检出阳性结果。dpi 14和21，所有动物经E1检测抗PRRSV抗体均呈阳性。在dpi -2，E2试验（用于检测1-4组2型抗PRRSV抗体）检出1/12假阳性结果。在dpi 14和21，阳性结果为6/12（50％）和10/12（83％）。E3试验（用来检测1型抗PRRSV抗体，组5）整个试验期间得出的都是阴性结果。

从检测的204个田间血清样本结果来看，E1检出2个阳性（1.0％），E2检出5个（2.0％），E3没有阳性。在dpi 7，15个口腔液样本当中8个（53％）E1检测为阳性，高于血清样本检出率。

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